牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体的制备及鉴定

作者：贺显晶; 张思瑶; 蒋剑成; 王丽娜; 肖佳薇; 汪锋锋; 孙东波; 郭东华^*

来源：中国生物制品学杂志, 2021, 34(01): 89-92.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003251

• 坏死杆菌
• 牛
• 43K OMP
• 单克隆抗体

目的制备牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法经IPTG诱导表达重组43K OMP,纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗43K OMP特异性抗体的杂交瘤细胞,制备腹水,对抗43K OMP单克隆抗体进行效价、亚类、免疫原性及特异性鉴定。结果获得3株稳定表达抗43K OMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,取其中效价最高的1株命名为O43,其重链为IgG1,轻链为κ链,上清和腹水效价分别为1∶25 600和1∶105;该单克隆抗体可与重组43K OMP发生特异性反应,且与转染后瞬时表达43K OMP的BHK-21细胞特异性结合,发生荧光反应。结论成功表达并纯化了43K OMP,制备了牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体,为研究坏死杆菌的感染机制及发病机理奠定了基础。

• 单位
  动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学