miR-122靶向调控CREB1对膀胱癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制

作者：王艺璇; 郭立华^*

来源：山东医药, 2020, 60(35): 26-29.

• 膀胱癌
• miR-122
• 环磷腺苷效应元件结合蛋白1
• 细胞增殖
• 细胞侵袭

目的观察微小RNA122(miR-122)通过靶向调控环磷腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用通路。方法 Target Scan7.1软件预测程序显示,miR-122与CREB1启动子区存在连续的结合位点,双荧光素酶基因报告实验结果显示,在膀胱癌J82细胞中miR-122可靶向负调控CREB1。将J82细胞分为三组,共转染组采用LipofectamineTM2000转染miR-122 mimic及CREB1过表达质粒,miR-122 mimic组转染miR-122 mimic,对照组转染对照质粒,转染48 h。采用MTS法和平板克隆实验检测细胞增殖能力(分别以增殖OD值和克隆形成数表示),Transwell小室实验检测细胞侵袭能力(以穿膜细胞数表示),Western blotting法检测细胞CREB1及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷酸化m TOR(p-mTOR)蛋白表达。结果与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞增殖OD值、克隆形成数、穿膜细胞数均降低,且miR-122 mimic组降低更明显(P均<0.05)。与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞CREB1、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低,且miR-122 mimic组降低更明显(P均<0.05)。与对照组比较,miR-122mimic组和共转染组细胞Akt、m TOR表达均无明显变化(P均> 0.05)。结论 miR-122通过作用靶点CREB1负向调控Akt/m TOR通路,从而抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院