摘要

目的 基于巨噬细胞极化研究枳壳甘草汤延缓椎间盘退变的作用机制。方法 将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组,每组8只。模型组和中药组采用针头刺破大鼠尾椎椎间盘造模。中药组采用枳壳甘草汤灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃。干预时间为20天。采用苏木精—伊红染色评估大鼠椎间盘组织的病理改变;免疫荧光检测椎间盘组织诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达;酶联免疫吸附测定检测血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumo rnecrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白质印迹法检测iNOS、基质金属蛋白酶-13(matrix metallo proteinase-13,MMP-13)、解聚蛋白样金属基质蛋白酶-5(a disintegrin-like and metalloprotease-5,ADAMTS-5)蛋白表达;实时荧光定量PCR检测MMP-13、ADAMTS-5基因表达。结果 病理切片结果显示,模型组椎间盘组织纤维环排列紊乱,髓核与纤维环界限模糊,伴随大量炎性细胞侵袭,中药组椎间盘组织病理改变较模型组有所改善。与对照组比较,模型组大鼠椎间盘MMP-13、ADAMTS-5蛋白和基因的表达显著升高(P<0.05),M1巨噬细胞标记蛋白iNOS表达显著升高(P<0.05),血清促炎因子IL-6和TNF-α含量显著升高(P<0.05)。与模型组比较,中药组大鼠椎间盘MMP-13、ADAMTS-5蛋白和基因的表达降低(P<0.05),iNOS蛋白表达降低(P<0.05),血清促炎因子IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05)。结论 吴门枳壳甘草汤可以有效延缓椎间盘组织的退变,其机制可能与抑制巨噬细胞M1型极化、调控炎症微环境相关。