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摘要
Argonaute7 （AGO7）在植物叶和花发育过程中发挥着重要的调控作用，而AGO7蛋白如何参与调控龙眼体胚的发育却未见报道。为了深入研究龙眼AGO7基因的功能与调控作用，本研究基于龙眼基因组数据库，采用RT-PCR法克隆龙眼DlAGO7基因，对其进行生物信息学分析，构建瞬时融合表达载体，明确其亚细胞定位，最后，利用实时荧光定量仪检测其在龙眼体胚不同阶段的相对表达情况。克隆获得DlAGO7的CDS序列为3 060 bp，编码1 019个氨基酸；所编码氨基酸序列含有PAZ和Piwi高度保守结构域，BlastP序列比对分析表明，DlAGO7蛋白与其他植物的AGO7蛋白具有高度同源性，系统进化发育树分析显示，DlAGO7蛋白与甜橙AGO7蛋白亲缘关系最近，与单子叶植物玉米和水稻的亲缘关系最远；亚细胞定位研究可知，龙眼DlAGO7基因为核定位基因；qRT-PCR分析表明，DlAGO7在龙眼球形胚阶段显著表达；克隆获得DlAGO7基因的5′端上游启动子序列长度为1 746 bp，启动子分析共预测出9类顺式作用元件。由此推测，DlAGO7基因可能在龙眼球形胚阶段发挥着重要的调空作用，该基因主要在细胞核中发挥作用。以上研究结果可为龙眼的分子育种提供理论基础。
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单位福建农林大学; 漳州卫生职业学院药学系
