微小RNA-34a调控瞬时受体电位通道家族4表达对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响

作者：阮远; 蒋焜; 宁金卓^*

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(12).

• 膀胱癌
• 微小RNA-34a
• 瞬时受体电位通道家族4
• 增殖
• 凋亡

目的探讨微小RNA(miR)-34a通过靶向调控瞬时受体电位通道家族4(TRPV4)对人膀胱癌细胞增殖和凋亡作用的影响。方法收集2019年1月至2020年8月武汉大学人民医院23例膀胱癌组织以及相应的癌旁组织临床样本, 采用实时荧光定量聚合酶链方法(RT-PCR)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本中miR-34a的表达水平。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测膀胱癌组织及癌旁正常组织临床样本TRPV4的表达水平。采用噻唑蓝(MTT)法, 双染法流式细胞术观察细胞增殖和凋亡水平的改变。采用荧光素酶报告法测定miR-34a与TRPV4的相关性。采用Western blot法检测细胞中TRPV4的蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果 miR-34a在膀胱癌旁组织中表达水平(4.38±0.42)高于膀胱癌组织(1.69±0.27), 差异有统计学意义(t=-9.332, P<0.05)。TRPV4在膀胱癌旁组织中表达水平(0.39±0.04)低于膀胱癌组织(0.63±0.06), 差异有统计学意义(t=15.962, P<0.05)。T24细胞中, miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(58.63±4.35)%、(72.36±6.45)%、(86.45±6.35)%]明显高于miR-34a mimics组24、48、72 h增殖率[(21.65±3.12)%、(36.82±4.51)%、(53.87±5.96)%], 差异有统计学意义(t=-8.730、-7.821、-6.480, P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(12.23±1.56)%]明显低于miR-34a mimics组[(31.09±2.43)%], 差异有统计学意义(t=11.313, P<0.05)。5637细胞中, miR-34a NC组24、48、72 h增殖率[(44.58±3.87)%、(52.14±5.23)%、(68.35±6.12)%]明显低于miR-34a inhibitors组24、48、72 h增殖率[(56.87±5.63)%、(68.78±6.87)%、(89.45±7.64)%], 差异有统计学意义(t=3.116、3.338、3.733, P<0.01)。miR-34a NC组凋亡率[(19.39±2.12)%]明显高于miR-34a inhibitors组[(9.94±1.05)%], 差异有统计学意义(t=6.919, P<0.05)。生物信息学和荧光素酶报告实验验证了TRPV4是miR-34a的下游靶基因。T24细胞中, miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.61±0.05)明显高于miR-34a mimics组(0.32±0.04), 差异有统计学意义(t=-7.844, P<0.05)。5637细胞中, miR-34a NC组TRPV4蛋白表达水平(0.53±0.05)明显低于miR-34a inhibitors组(0.79±0.06), 差异有统计学意义(t=6.919, P<0.05)。结论 miR-34a通过靶向调控TRPV4的表达, 从而影响膀胱癌细胞的增殖和凋亡能力。

• 单位
  武汉大学人民医院