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摘要
采用N端截短方式对Bacillus subtilis 168来源普鲁兰酶进行蛋白结构改造，构建不同形式的截短突变体，考察N端结构对酶学特性的影响。利用基因工程的手段分别删去CBM41结构域N端前2、4和6个氨基酸，获得突变体M1(ΔN2)、M2(ΔN4)和M3(ΔN6)。3种突变体最适反应温度(40-45℃)和最适pH(6.0)均与WT一致，WT、M1、M2和M3的Tm值分别为48.57℃、50.03℃、48.43℃和49.50℃，M1、M2和M3的比活力均高于野生型，是WT的1.18、1.60和2.44倍，WT、M1、M2和M3的Km值分别为23.89、29.01、17.29和19.08 mg/mL。上述结果表明，通过截短普鲁兰酶N端氨基酸可获得性质得到改良的突变体，为提高该酶的热稳定性、比活力和底物结合能力提供新的方法和思路。
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