基于离心式微流控技术的直扩PCR法在流感病毒分型检测中的应用

作者：刘秀卿; 顾大勇; 李国丹; 黄磊; 周敏

来源：临床检验杂志, 2023, 41(11): 801-806.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2023.11.01

• 流感病毒
• 分型
• 离心式微流控
• 直扩聚合酶链式反应

目的 建立一种基于离心式微流控技术的检测流感病毒分型的直扩PCR法。方法 设计特异性引物探针，采用离心式微流控芯片对流感病毒不同分型进行直扩荧光PCR检测，进一步评价该方法灵敏度、特异性、重复性和线性关系；用该直扩荧光PCR法检测576例临床标本，并用核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行验证。结果 离心式微流控直扩PCR法的总体最低检出限为500 copies/mL;与常见呼吸道病原体无交叉反应；精密度均小于4.34%;具有良好的线性关系(R2均>0.98);576例临床标本中检出甲型流感病毒通用型75例，其中H1N1 26例，H3亚型49例；乙型流感病毒通用型74例，均为Victoria系。与对照试剂比较，离心式微流控PCR法在流感病毒不同分型的灵敏度、特异性、总符合率均高于92.9%,两种方法检出阳性率(IAV、H1N1、H1、H3、IBV和IBV-V)差异均无统计学意义(χ2值分别为3.200、0.500、0.500、1.333、2.250、2.250,P均>0.05),具有极好的一致性(Kappa值均>0.96)。结论 建立的离心式微流控直扩PCR法操作简便，灵敏度和特异性较高，可为流感病毒的临床诊断和流行病学调查提供有效的检测工具。

• 单位
  深圳大学; 深圳市第二人民医院