大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究

作者：郭慧; 毛萌; 俞丹; 周晖; 童煜

来源：中国当代儿科杂志, 2014, 16(12): 1271-1274.

DOI：10.7499/j.issn.1008-8830.2014.12.017

• 星形胶质细胞
• 细胞培养
• 神经胶质原纤维酸性蛋白
• 大鼠

目的改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞(astrocyte,AS)的体外培养方法,为进一步研究奠定基础。方法选取生后3d的Sprague-Dawley大鼠的大脑皮层,常规分离纯化AS,低密度种植,培养箱中孵育1h后换瓶,24h后换液,细胞融合成单层后传代,传代后维持在含10%胎牛血清DMEM培养基中培养,并在长时期内不给予更换或补加培养液。采用GFAP/DAPI免疫荧光法鉴定AS细胞。结果体外培养的纯化大鼠大脑皮层AS,表现为细胞突起细长、胞体明显缩小、形态多样的纤维型AS,最后细胞突起之间相互连接形成AS网络。GFAP/DAPI免疫荧光染色结果示GFAP阳性细胞达98%以上。结论大鼠大脑皮质AS的体外培养改良方法培养的AS体外形态、发育特点均与在体内AS基本一致,且纯度较高,为进一步进行AS的研究创造了条件。

• 单位
  四川大学华西第二医院