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摘要
目的 基于网络药理学分析和实验验证探讨党参-茯苓配伍对D-半乳糖诱导的痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响及其作用机制。方法 在中医药百科全书数据库(ETCM)、中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)和DisGeNET数据库分别筛选出党参、茯苓的有效成分及阿尔茨海默病(AD)的靶点，采用Cytoscape软件构建成分-疾病靶点网络图并借助STRING数据库京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。用4.5、9 g·kg-1党参-茯苓水煎液灌胃处理D-半乳糖诱导的痴呆模型小鼠1个月后，采用水迷宫评价其学习记忆能力改变；伊红-苏木精染色观察海马病理形态学变化；免疫荧光观察海马突触素(Synaptophysin)、离子化钙结合适配分子1(IBA1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸受体2(GluR2)、糖皮质激素受体(GR)、毒蕈碱型胆碱受体M1(CHRM1)、烟碱型胆碱受体β2(CHRNB2)和5-羟色胺受体1A(5-HT1A)的阳性表达；酶联免疫吸附法检测脑组织谷氨酸、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)含量。结果 网络药理学筛选获得党参和茯苓有效成分67个、靶点375个和AD疾病靶点3 052个，共同靶点187个；KEGG富集分析得到111条与AD疾病相关的信号通路，主要涉及神经活性配体受体相互作用等。与空白组比较，模型组小鼠第5天的逃避潜伏期明显延长(P<0.01)，平台象限停留时间(P<0.05)、穿越平台象限次数(P<0.05)和游泳平均速度(P>0.05)均降低，前三者的差异有统计学意义；海马区可见明显的神经细胞排列紊乱、细胞间间隙增加和细胞变性或死亡，且其受损神经细胞评分明显升高(P<0.01)；海马区IBA1和GFAP的阳性面积明显增加(P<0.001,P<0.01)，但Synaptophysin的阳性面积减少的差异无统计学意义(P>0.05)；海马区GluR2、CHRM1和CHRNB2的平均荧光强度均明显下降(P<0.01,P<0.05)而GR则明显升高(P<0.01)；脑组织谷氨酸和TNF-α含量均明显升高(P<0.05,P<0.001)而IL-10含量则明显降低(P<0.001)。与模型组比较，党参-茯苓高、低剂量组第5天的逃避潜伏期明显缩短(P<0.01)，平台象限停留时间明显升高(P<0.05)，但平均游泳速度和穿越平台象限次数升高的差异均无统计学意义(P>0.05)；党参-茯苓高、低剂量组的海马神经细胞均排列较整齐、紧密，但还可见神经细胞变性或死亡，且受损神经细胞评分明显降低(P<0.01)；海马区IBA1和GFAP的阳性面积明显减小(P<0.001,P<0.05)，但Synaptophysin的阳性面积增加的差异无统计学意义(P>0.05)；海马区GluR2、CHRM1、CHRNB2和5-HT1A的平均荧光强度均明显升高，而GR则明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)；脑组织谷氨酸和TNF-α含量均明显降低(P<0.001)，而IL-10含量则明显升高(P<0.05,P<0.001)。结论 党参-茯苓配伍可改善D-半乳糖诱导的痴呆模型小鼠学习记忆能力，其作用机制可能与其调节神经活性配体受体相互作用有关。
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单位国家中医药管理局; 重庆市中药研究院; 重庆医科大学
