低氧诱导胰腺癌细胞通过外泌体途径分泌高迁移率族蛋白1

作者：王鸣; 宋廉; 张礼荣; 龚爱华; 朱海涛; 王冬青^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2019, 29(02): 98-102.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y180295

• 低氧
• 高迁移率族蛋白1
• 外泌体
• 胰腺癌

目的:研究低氧诱导条件下胰腺癌细胞中高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)的分泌途径。方法:经GEO和TCGA数据库分析HMGB1在胰腺癌样本中的表达;低氧处理胰腺癌PaTu8988细胞0,6,12,24,48 h,免疫印迹法检测培养上清液中HMGB1的含量;采用外泌体提取试剂盒分离常氧和低氧培养液中的外泌体,运用透射电镜观察外泌体膜结构,运用免疫印迹法检测外泌体中的HMGB1以及外泌体标志蛋白CD9、CD63、CD81以及HSP70的表达;利用免疫荧光法和激光扫描共聚焦显微镜观察HMGB1在PaTu8988细胞中的定位情况。结果:数据库分析结果表明,与健康胰腺组织相比,HMGB1在胰腺癌组织中呈高表达(P<0.01),且高表达者生存期明显短于低表达者(P<0.05)。低氧处理48 h,细胞培养上清液中的HMGB1含量最多,明显高于6,12,24 h。透射电镜观察到培养上清液中有微囊泡结构,直径在100 nm左右,蛋白质免疫印迹法检测到外泌体膜标志蛋白CD9,CD63,CD81,HSP70的表达和外泌体中HMGB1的表达。免疫荧光结果显示,低氧情况下HMGB1和外泌体共定位增多。结论:低氧处理条件下,胰腺癌细胞中HMGB1可通过外泌体途径释放到细胞外。

• 单位
  江苏大学附属医院; 江苏大学