挤出法诱导脂质体膜融合的研究

作者：秦文娟; 任颖; 张晗; 刘睿; 陈汉; 刘玲蓉^*

来源：国际生物医学工程杂志, 2018, 41(06).

• 挤出法
• 脂质体
• 膜融合
• 荧光共振能量转移

目的研究挤出法在诱导脂质体膜融合或膜组分混合中的应用,并考察不同挤出条件对脂质体膜融合率的影响。方法将N-(7-硝基苄基-2-氧杂-1,3-重氮-4-基)磷脂酰乙醇胺(N-NBD-PE)和N-(丽丝胺罗丹明B磺酰基)磷脂酰乙醇胺(N-Rh-PE)标记的1,2-二油酰基卵磷脂(DOPC)脂质体以及无荧光标记的DOPC单层脂质体混合后挤出处理,采用激光扫描共聚焦显微镜观察混合脂质体挤出前后的荧光变化,并用荧光共振能量转移法计算混合脂质体的膜融合率。同时,分别考察挤出次数、挤出压力和温度对脂质体膜融合率的影响。结果激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,荧光标记脂质体和无荧光标记脂质体混合悬液经挤出处理后,N-NBD-PE绿色荧光的分布密度和强度明显增加,证实已发生了膜融合。经过75次挤出处理后,脂质体膜融合率可达26%。挤出次数、挤出压力和温度对脂质体膜融合率具有明显影响,挤出次数越高、挤出压力越小和生理温度下挤出脂质体膜融合率越高。结论挤出法可诱导不同磷脂组分的脂质体发生膜融合和膜组分混合,且制得的脂质体粒径分布更窄,有望成为一种诱导脂质体或脂质囊泡双层膜融合的新方法 。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院