I2PP2A蛋白调控PP2A/Akt信号通路对神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

作者：傅品; 黄娟; 夏嘉辉; 张文; 冯琼^*

来源：医学研究杂志, 2023, 52(09): 146-152.

• 蛋白磷酸酶2A抑制剂-2
• 神经母细胞瘤
• 增殖
• 凋亡
• PP2A/Akt

目的 探讨蛋白磷酸酶2A抑制剂-2(protein phosphatase 2A inhibitor-2,I2PP2A)调控PP2A/Akt信号通路对人神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞转染I2PP2A-shRNA干扰质粒及对照质粒后分为siI2PP2A组及siC组。CCK-8、细胞克隆形成实验、细胞周期实验用于检测细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot法检测细胞内相关蛋白相对表达量；磷酸酶检测系统试剂盒测定PP2A活性；给予PP2A抑制剂冈田酸(okadaic acid, OA)处理细胞并检测增殖活性及PP2A/Akt信号通路变化。结果 与siC组比较，siI2PP2A组48h及72h的吸光度(A)值下降(P<0.01),细胞克隆形成数目显著降低(P<0.01);siC组G0/G1期、S期、G2/M期、细胞凋亡比例分别为43.29%±3.68%、31.76%±2.42%、24.96%±2.34%、1.89%±1.09%,siI2PP2A组为57.00%±3.90%、25.88%±2.06%、17.13%±2.07%、15.18%±5.60%,与siC组比较，siI2PP2A组G0/G1期细胞比例和凋亡细胞比例升高，S期和G2/M期细胞比例下降(P<0.05)。同时，siI2PP2A组较siC组PP2A活性显著增加(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-Akt蛋白相对表达量降低(P<0.05),Bax、cleaved-PARP蛋白相对表达水平升高(P<0.01)。进一步给予PP2A抑制剂OA后，可部分恢复siI2PP2A组CyclinD1、Bcl-2、p-Akt、Bax、cleaved-PARP蛋白水平(P<0.05)并逆转下调I2PP2A导致的增殖抑制(P<0.05)。结论 下调I2PP2A介导的神经母细胞瘤细胞增殖抑制和凋亡增加可能与PP2A/Akt信号通路密切相关。

• 单位
  华中科技大学同济医学院