共表达甲型流感病毒M1和HA双基因的重组腺病毒的构建及鉴定

作者：郭建强; 姚立红; 陈爱珺; 徐一; 贾润清; 薄洪; 董婕; 周剑芳; 舒跃龙; 张智清

来源：病毒学报, 2009, (02): 107-112.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001974

• M1蛋白
• 血凝素
• 内部核糖体进入位点序列
• 腺病毒载体 M1 protein
• Hemagglutinin(HA)
• IRES
• Adenoviral vector

以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,通过引入内部核糖体进入位点序列(IRES),构建共表达H5N1亚型禽流感病毒膜蛋白基因M1和HA的重组腺病毒。PCR扩增禽流感病毒H5N1亚型M1和HA基因的全长可读框片段,先后亚克隆入pStar载体,然后扩增M1-IRES-HA片段并将其插入穿梭载体pShuttle-CMV,再与pAd-Easy载体在BJ5183菌中通过同源重组产生重组腺病毒载体,转化293细胞,包装出重组腺病毒Ad-M1/HA。将Ad-M1/HA感染293细胞,可观察到明显细胞病变效应,用免疫荧光及Western-blot方法均检测到M1...

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室