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摘要
目的 观察温肾消水膏皮肤给药舒缓H22肝癌腹水瘤模型小鼠癌性腹水的作用机制。方法 将9只C57BL/6小鼠随机分为模型组、温肾消水膏组、空白组，每组3只，其中模型组、温肾消水膏组采用腹腔接种H22肝癌细胞悬液的方法建立H22肝癌腹水瘤小鼠模型。空白组和模型组不予药物，温肾消水膏组从接瘤后24 h开始，每日予温肾消水膏外敷腹部，每天4 h,连续10天。于第11天以颈椎脱臼法处死小鼠，取腹水、肾脏组织；用注射器计量腹水量，采用显微镜计数法计算肿瘤细胞数，用蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测肾脏组织的水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白2(AQP2)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达，用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肾脏组织中AQP1、AQP2、TNF-α、VEGF-A mRNA表达水平；对肾脏组织进行苏木素-伊红(HE)染色和马松(Masson)染色，观察肾脏的病理形态学改变。结果 与模型组比较，温肾消水膏组腹水量减少，但比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较，温肾消水膏组腹水瘤细胞计数减少，但比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较，模型组、温肾消水膏组小鼠肾脏组织VEGF-A蛋白表达均降低(P<0.05),AQP1、AQP2、TNF-α蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较，温肾消水膏组小鼠肾脏组织AQP1蛋白表达升高(P<0.05),AQP2、TNF-α、VEGF-A蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较，模型组、温肾消水膏组肾脏VEGF-A mRNA表达均降低(P<0.05),AQP1、AQP2、TNF-α mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较，温肾消水膏组小鼠肾脏组织AQP1、AQP2、TNF-α、VEGF-A mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色结果显示，与空白组比较，温肾消水膏组、模型组小鼠肾小球系膜区增宽，系膜细胞增生，肾小管变性，部分区域肾小球萎缩，肾间质有炎性细胞浸润；与模型组比较，温肾消水膏组小鼠肾间质炎性细胞浸润情况较少，系膜细胞增生减少。Masson染色结果显示，与空白组比较，模型组、温肾消水膏组有大量胶原纤维沉积于肾小球系膜区；与模型组比较，温肾消水膏组胶原纤维较少。结论 温肾消水膏有一定的舒缓肝癌癌性腹水作用，其机制可能涉及以下方面：一是温肾消水膏减轻了肾间质炎症，减少肾小球系膜细胞增生，改善了肾脏病理；二是可能与温肾消水膏上调肾脏AQP1、AQP2蛋白表达，调节肾脏VEGF蛋白表达使之接近正常的作用有关。
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单位中心实验室; 自贡市第一人民医院; 广州中医药大学
