摘要
目的 :探讨沙参麦冬汤(Shashen-Maidong Decoction,SMD)含药血清在间歇性低氧(intermittent hypoxia,IH)条件下对小鼠非小细胞肺癌LLC细胞增殖及迁移和侵袭能力的影响,及其可能的作用机制。方法 :用C57/BL6小鼠制备SMD含药血清。在IH条件下用不同浓度的SMD含药血清处理LLC细胞,分别采用CCK-8法和结晶紫染色法检测SMD含药血清对LLC细胞增殖能力的影响,用TUNEL法检测SMD含药血清对细胞凋亡的影响,用划痕愈合实验和Transwell小室实验检测SMD含药血清对细胞迁移和侵袭能力的影响。采用荧光探针DCFHDA法原位观测LLC细胞中活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)的生成情况以反映细胞氧化应激水平。采用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 2,NOX2)和NOX4蛋白的表达水平。结果 :与常氧组相比,IH条件下LLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P <0.01),凋亡水平明显下降(P <0.01),而氧化应激水平增高(P <0.01)。SMD含药血清干预后显著抑制了IH环境下LLC细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P <0.05),并促进了LLC细胞的凋亡(P <0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,与常氧组相比,IH条件下LLC细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9、NOX2和NOX4蛋白的表达水平明显上调,E-cadherin蛋白的表达水平明显下调(P <0.05);采用SMD含药血清处理后能显著下调LLC细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9、NOX2和NOX4蛋白的表达水平,同时上调E-cadherin蛋白的表达水平(P <0.05)。结论 :SMD含药血清促进了IH环境下LLC细胞的凋亡,抑制了LLC细胞的增殖及迁移和侵袭,其机制可能与降低细胞的氧化应激水平有关。
-
单位河北中医学院