摘要
目的观察转染骨形态发生蛋白7(BMP7)基因的骨髓间充质细胞(BMSCs)所表达的BMP7蛋白在体外诱导该细胞向软骨细胞方向分化的作用。方法分别取诱导液诱导的BMSCs(诱导组)、转染BMP7基因的BMSCs(转染组)以及未处理的BMSCs(对照组),在6孔板中细胞爬片,经HE、阿尔新蓝染色后,在倒置显微镜下观察形态。3组BMSCs培养7、14、21 d后,以半乳糖醛酸为对照品绘制标准曲线法测定培养液中糖胺多糖(GAG),ELISA法测定胶原蛋白Ⅱ。结果 HE、阿尔新蓝染色后,转染组和诱导组BMSCs分别呈红色和蓝色,具有软骨细胞特性。BMP7诱导后的细胞团表达了GAG和胶原蛋白Ⅱ。第21天,转染组GAG为(39.5±5.4)mg/L,胶原蛋白Ⅱ为(152.8±14.5)μg/L;诱导组GAG为(40.8±6.1)mg/L,胶原蛋白Ⅱ为(155.5±19.3)μg/L;对照组GAG为(17.1±3.4)mg/L,胶原蛋白Ⅱ为(89.7±14.3)μg/L;与对照组比较,转染组与诱导组GAG、胶原蛋白Ⅱ水平明显增高(P均<0.05),转染组与诱导组比较,则未见明显改变(P>0.05)。结论转染BMP7基因的BMSCs表达的活性BMP7能够诱导BMSCs向软骨细胞方向分化,且其诱导水平达到了诱导液的诱导水平。
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