摘要
目的 建立一种全自动、快速、准确地测定人血液中甲氨蝶呤浓度的方法。方法 采用双三元液相色谱系统串联紫外检测器,使用Athena C18-WP(4 mm×20 mm,5μm)色谱柱作为在线固相萃取柱,Athena C18-WP柱(4.6 mm×150 mm,5μm)作为分析柱;流动相为10 mmol·L-1的乙酸铵,固定相为乙腈,流速为1 mL·min-1;检测波长为306 nm;柱温为40℃;进样体积为100μL。血清样本经过沉淀试剂(5%三氯乙酸+10%硫酸锌)沉淀蛋白后进样。同时考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与准确度、回收率和稳定性。结果 甲氨蝶呤在0.078~8.000μmol·L-1范围内线性良好(R2=0.999 4),提取回收率分为86.41%~87.09%,日内、日间RSD<7%。结论 该方法准确、重现性好、简化了样本前处理步骤,提高了分析效率,适用于大剂量甲氨蝶呤治疗时的血药浓度检测。
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