复合探针实时荧光PCR检测细菌耐药基因bla_(NDM-1)方法的建立

作者：吕虹; 刘志红; 刘琪琦; 孙晓彦; 陈苏红; 王升启

来源：生物技术通讯, 2012, (03): 411-414.

• 新德里金属β内酰胺酶1
• blaNDM-1基因
• 实时荧光PCR
• 复合探针
• 分子诊断技术 New Delhi metallo-β-lactamase 1
• blaNDM-1 gene
• real-time polymerase chain reaction
• complex probe
• molecular diagnostic techniques

目的:建立一种检测编码新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1)的细菌耐药基因blaNDM-1的复合探针实时荧光PCR方法。方法:基于复合探针技术原理,以blaNDM-1基因作为待检靶基因建立检测方法,对PCR扩增体系中镁离子浓度、PCR退火温度等进行优化,并对检测的灵敏性、特异性、重复性等进行评价。结果:优化了最佳反应体系和扩增条件;以灵敏度质控品进行灵敏度实验,最低检测限可达2拷贝/体系;非耐药性菌株的检测结果均为阴性;批间批内变异系数均小于5%;只有产NDM-1的鲍曼不动杆菌检测为阳性,其他377株临床分离菌和阴性对照均无响应。结论:建立了检测含blaNDM-1基因的菌株的方法,具有很好的灵敏...

• 单位
  深圳市普瑞康生物技术有限公司; 北京工业大学; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所