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摘要
用试剂盒法提取菜豆(Phaseolus vulgarisL.)嫩叶的基因组DNA,并以此为模板对影响ISSR-PCR反应体系的Taq酶量、模板浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度5个因素进行了优化。结果表明总体积为25μL的菜豆ISSR-PCR反应最优体系为:45ng模板DNA,1UTaq酶,2mmol/LMg2+,0.6μmol/L引物和0.1mmol/LdNTP,在此基础上对循环次数进行优化,最终确定最佳循环次数为45次。利用该体系,选取引物823对8份材料进行扩增,验证了该体系的稳定性。本研究旨在建立菜豆ISSR反应的最优体系,为今后利用该分子标记技术进行有关菜豆种质及遗传方面的研...
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