摘要
目的:探讨miR-302c调控CXC趋化因子配体8(CXCL8)表达对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:收集行手术治疗的ESCC病人ESCC组织和其对应的癌旁组织,以及人ESCC细胞系Eca109、Ec9706、TE-11、TE-10、食管正常上皮细胞系Het-1A为研究对象,qRT-PCR检测miR-302c表达;利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对Eca109细胞进行转染,分组为:空白组(细胞未转染)、miR-NC组、miR-302c mimics组、si-CXCL8组、si-NC组、miR-302c mimics+OE-NC组、miR-302c mimics+OE-CXCL8组,qRT-PCR检测各组细胞中miR-302c表达;MTT法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞侵袭情况;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-302c与CXCL8靶向关系;Western blotting检测CXCL8、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:miR-302c在ESCC组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.05),与人食管正常上皮细胞系Het-1A比较,人ESCC细胞系Eca109、Ec9706、TE-11、TE-10中miR-302c表达水平降低(P<0.05),且Eca109细胞中miR-302c表达水平最低,因此,选择Eca109细胞进行后续研究;miR-302c靶向负调控CXCL8表达;上调miR-302c和沉默CXCL8均能抑制Eca109细胞的增殖与侵袭,并降低Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);过表达CXCL8可逆转上调miR-302c对Eca109细胞增殖与侵袭的影响。结论:上调miR-302c表达可通过靶向抑制CXCL8表达,抑制ESCC细胞的增殖和侵袭。
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单位江苏省徐州市中心医院