基于mRNA转录组及s RNA测序技术探讨益肾方干预糖尿病肾病的机制

作者：何新荣; 卢汉祺; 邓丽娥; 钟云良; 李强^*

来源：广州中医药大学学报, 2023, 40(09): 2291-2303.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2023.09.025

• 益肾方
• 糖尿病肾病
• mRNA转录组
• sRNA测序
• 炎症反应
• 脂代谢
• 免疫反应
• 小鼠

【目的】探讨益肾方（由黄芪、山茱萸、菟丝子等组成）对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用机制。【方法】将28只db/db小鼠随机分为模型组，益肾方低、高剂量组和洛汀新组，另外设7只同遗传背景的db/m小鼠为正常组，根据分组灌胃干预12周。观察各组小鼠体质量，生化指标血糖、尿微量白蛋白（MAU）、尿微量白蛋白/肌酐比值（UACR）、胱抑素C(Cys-C)，肾间质纤维化相关蛋白神经钙黏蛋白（N-cad）、纤维连接蛋白（FN）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和上皮钙黏蛋白（E-cad）表达水平及肾脏病理改变。应用二代高通量测序技术获取小鼠肾脏组织m RNA转录组及miRNA的表达矩阵，对获得的表达矩阵进行差异基因分析，然后使用R语言、DIANA-miRPath网站分别对差异表达mRNA、miRNA进行基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。【结果】（1）与模型组比较，益肾方低、高剂量组小鼠体质量、UACR、MAU、Cys-C水平降低（P<0.05），血糖无显著性差异（P>0.05），肾脏组织E-cad表达升高、N-cad表达降低（P<0.05）,FN、α-SMA无显著性差异（P>0.05），肾脏组织病理损伤减轻。在体质量、血糖、MAU及肾组织E-cad、N-cad、FN、α-SMA表达方面，益肾方低、高剂量组与洛汀新组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。（2）m RNA转录组测序正常组比对模型组共发现293个差异基因，正常组比对益肾方治疗组共有101个差异基因，模型组比对益肾方治疗组共有10个差异基因；各组差异mRNA的GO分析主要富集在炎症反应、脂肪酸代谢、免疫反应相关条目，京都基因与基因组百科全书富集通路主要涉及PPAR信号通路、IL-17信号通路等。sRNA测序正常组比对模型组共6个差异miRNA，其他组未发现差异miRNA,GO富集条目有离子结合、细胞内溶质等，KEGG富集通路NF-κB、Hippo信号通路、细胞外基质受体作用通路。【结论】益肾方可有效改善糖尿病肾病小鼠的生化指标，减轻肾脏病理变化，其肾脏保护作用可能是通过激活PPAR信号通路，抑制IL-17、NF-κB信号通路，从而调节炎症反应、脂代谢、免疫反应来实现的。

• 单位
  广州中医药大学; 东莞市中医院