加减薯蓣丸调控Cx30/Glu/NMDAR1通路改善血管性痴呆大鼠髓鞘损伤的研究

作者：王建婷; 谭子虎^*; 周剑杰; 王静; 鄢文静; 李贤炜

来源：湖北中医药大学学报, 2023, 25(03): 10-15.

• 血管性痴呆
• Cx30
• 加减薯蓣丸
• 髓鞘损伤

目的 观察加减薯蓣丸(MDP)对血管性痴呆(VD)模型大鼠海马髓鞘损伤的影响及其作用机制。方法 选取SPF级SD雄性大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、MDP高、中、低剂量组,每组12只。除假手术组外,其余4组均采用双侧颈动脉结扎改良法进行VD模型制备,造模结束后通过水迷宫筛选造模成功大鼠进行灌胃。MDP高、中、低剂量组灌胃剂量分别为10、5、2.5 g/(kg·d),其余组给予等量生理盐水。28d灌胃结束后,通过新物体识别实验检测大鼠空间学习记忆能力,HE染色观察海马区神经元结构,生化检测海马CA1区活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷氨酸(Glu)含量变化;固蓝染色(LFB)检测海马CA1区髓鞘结构变化,免疫荧光检测海马CA1区少突胶质细胞转录因子2(Olig2)、星形胶质细胞标记物(GFAP)、半通道蛋白Connexin-30(Cx30)的表达,蛋白免疫印迹法(WB)检测海马CA1区谷氨酸转运蛋白1(EAAT1)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)、Cx30蛋白表达。结果 与假手术组相比,VD模型大鼠新物体识别指数明显下降(P<0.01);海马神经元间隙增大,细胞排列紊乱,胞质与胞核染色加深;髓鞘染色变淡,细胞结构松散;海马CA1区ROS、Glu水平显著升高(P<0.01),SOD水平明显降低(P<0.05);Olig2荧光强度明显降低;EAATl、Cx30蛋白表达显著升高,NMDAR1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,给予MDP干预后,大鼠新物体识别指数明显升高(P<0.05);神经元排列紧密,胞质饱满,染色适中;髓鞘染色均匀且细胞排列紧密;ROS、Glu水平显著降低,高、中剂量组最为明显(P<0.01),高剂量组SOD水平较模型组明显升高(P<0.05);Olig2荧光强度增强;EAAT1、Cx30蛋白表达明显降低(P<0.05),NMDAR1蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 MDP能改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻氧化应激反应,缓解星形胶质细胞损伤,抑制Cx30的表达,降低Glu水平,促进少突谱系细胞的分化与成熟,从而减轻髓鞘损伤有关。

• 单位
  湖北省中医院; 湖北中医药大学