摘要

目的 探究喉癌细胞外泌体miR-20a对肿瘤相关巨噬细胞增殖和凋亡的影响。方法 提取并且鉴定16HBE、TU686、TU177、TU212细胞所分泌的外泌体(记为16HBE exo、TU686 exo、TU177 exo、TU212 exo)。TU212细胞转染miR-20a模拟物和阴性对照,并收集转染后TU212所分泌的外泌体(记为miR-20a exo和miR-NC exo),M2型巨噬细胞与PBS以及16HBE exo、TU686 exo、TU177 exo、TU212 exo、miR-NC exo和miR-20a exo共孵育48 h(记为PBS组、16HBE exo组、TU686 exo组、TU177 exo组、TU212 exo组、miR-NC exo组和miR-20a exo组),CCK8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western bloting检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(PKB又称AKT)磷酸化水平。结果 本文所提取的外泌体符合其结构和生物学特征。TU686 exo组、TU177 exo组、TU212 exo组M2型巨噬细胞增殖能力显著高于PBS组(P<0.05),细胞凋亡率(9.67%±1.53%、8.67%±2.08%、4.00%±1.00%)显著低于PBS组(21.67%±4.72%)(P<0.01),PI3K(0.81±0.03、0.70±0.03、1.10±0.08)和AKT(1.55±0.11、1.86±0.06、2.13±0.10)磷酸化水平显著高于PBS组(0.19±0.04和0.11±0.03)(P<0.001)。miR-20a exo组M2型巨噬细胞增殖能力显著高于miR-NC exo组(P<0.05),细胞凋亡率(8.33%±1.52%)显著低于miR-NC exo组(14.33%±1.53%)(P<0.01),PI3K(1.05±0.09)和AKT(1.55±0.11)磷酸化水平显著高于miR-NC exo组(0.11±0.04和1.19±0.03)(P<0.001)。结论 喉癌细胞外泌体miR-20a可调控M2型巨噬细胞的增殖和凋亡,其机制可能为激活PI3K/AKT信号通路。

  • 单位
    武警后勤学院

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