摘要
目的:探讨体外沉默核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)纤维化的影响。方法:提取1~3 d SD乳鼠心脏CFs培养,分为Control组、AngⅡ组、AngⅡ+空载病毒(vehicle)组和AngⅡ+NLRP3-RNAi组。免疫荧光鉴定CFs细胞;CCK8检测CFs细胞的增殖;实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白免疫印迹(Western blotting)检测CFs的NLRP3、胶原Ⅰ(Collagen Ⅰ)及胶原Ⅲ(CollagenⅢ)的表达水平。结果:与Control组比较,10-6mol/L AngⅡ可使CFs明显增殖(P<0.05),AngⅡ组NLRP3、Collagen Ⅰ和CollagenⅢ的mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05);与AngⅡ+vehicle组比较,AngⅡ+NLRP3-RNAi组NLRP3、Collagen I和CollagenⅢ的mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:体外沉默NLRP3后可有效减轻AngⅡ诱导的心肌纤维化,其具体机制还有待进一步研究。
- 单位