二十碳五烯酸对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响

作者：郝燕霞^*; 张**; 李欢; 闫康麟

来源：中华生物医学工程杂志, 2021, 27(06).

• 二十碳五烯酸
• HER2阳性乳腺癌
• 细胞焦亡
• AU-565
• SK-BR-3
• MDA-MD-435

目的探讨二十碳五烯酸(EPA)对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响。方法用EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞, 检测EPA对HER2阳性乳腺癌细胞的细胞毒性作用。Annexin V/PI分析EPA诱导的细胞存活率下降是否因细胞死亡增加而发生。EPA处理后检测细胞焦亡通路中关键分子标志物的表达状态。结果 EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞后, HER2阳性乳腺癌细胞AU-565, SK-BR-3, MDA-MD-435的细胞活力减少(P<0.05);但是对正常乳腺细胞MCF 10A, Hs 578Bst的细胞活力无显著影响(P>0.05)。EPA处理24 h后, AU-565, SK-BR-3, MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞均呈增加(P<0.05);MCF 10A, Hs 578Bst中膜联蛋白+/PI-细胞增加(P<0.05)。EPA处理后, 在AU-565, SK-BR-3, MDA-MD-435中, NF-κB通路关键蛋白p65、IKKα/β、IκBα的磷酸化水平上升;而在MCF 10A, Hs 578Bst中, p65、IKKα/β、IκBα的磷酸化水平无显著改变。此外, 分子对接发现EPA可能与NF-κB通路上游蛋白NEMO的K381位点存在相互作用, 最低结合能为-7.33 kcal/mol。EPA处理后, NEMO敲除的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著减少(P<0.05);在NEMO敲除细胞中过表达NEMO野生型或NEMO K381R突变型, 发现过表达NEMO野生型的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著增加(P< 0.05), 表达NEMO K381R突变型的MDA-MD-435细胞中膜联蛋白+/PI+细胞显著减少(P<0.05)。EPA处理后, 在AU-565, SK-BR-3, MDA-MD-435中, Pro-IL-1β和ASC的表达水平下降, 而cleaved caspase1、cleaved Gasdermin D的表达水平上升, IL-1β的分泌水平上升(P<0.05), HMGB1发生了细胞质转移;而在MCF 10A, Hs 578Bst中, Pro-IL-1β、ASC、cleaved caspase1、cleaved Gasdermin D的表达水平改变无统计学意义, IL-1β的分泌水平变化无统计学意义(P>0.05), HMGB1未发生细胞质转移。结论 EPA与NEMO的K381位点相互作用, 激活了NF-κB通路, 促进了caspase1、IL-1β和Gasdermin D的切割, 增加了IL-1β的分泌水平和HMGB1的细胞质转移水平, 最终诱发了HER2阳性乳腺癌细胞焦亡。

• 单位
  山西省人民医院