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摘要
为了实现对婴幼儿配方羊乳粉中乳源成分进行准确判别，本研究将基因检测方法作为初筛方法，以蛋白质双向电泳作为确证方法，研究了该技术路线下对乳源成分检测的灵敏度、准确性等指标。优化建立的基于嗜热蛋白酶的一步式DNA提取法，仅需通过温控反应在17 min内完成DNA步骤，极大缩短了样品前处理时间；建立的快速实时荧光PCR反应程序仅需28 min 26 s即可完成检测。通过牛（牛、水牛、牦牛），羊（山羊和绵羊），山羊、绵羊乳源成分，以及哺乳动物内参照检测体系，可以实现对低至100 pg/μL～10 pg/μL DNA的检测，对混合样品中牛源性成分检测的灵敏度可达1%（w/w）。然后结合双向电泳技术进一步确证产品的蛋白成分来源，可以判定牛基因检测阳性的样品是否含有来源于牛乳酪蛋白或乳清蛋白，进而对样品的真实性进行判定。两种方法联合检测解决了以往婴幼儿配方乳粉检测中因配料复杂、乳源判别困难的瓶颈问题。
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