一种新型肌酸激酶检测方法的研究

作者：刘贺; 李宇茜; 李星影; 王睿; 杨雨玫; 徐小平^*

来源：华西药学杂志, 2020, 35(06): 626-629.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2020.06.009

• 肌酸激酶活性
• 肌酸
• 检测机理
• 个体差异
• 高效液相色谱法
• 比色法
• 酶偶联法
• 快检法
• 大鼠

目的根据肌酸激酶(CK)的检测原理,以肌酸为对象,快速检测CK的活性。方法根据CK可催化磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)产生等摩尔肌酸和三磷酸腺苷(ATP)的机理,通过肌酸与碱性甲萘酚和丁二酮作用显色(525 nm),用比色法测定尿肌酸的含量。经HPLC(验证集)的验证和经典酶偶联法(校正集)的校正,由MedCal统计软件计算尿肌酸含量与尿ATP含量的关联性,以此说明肌酸值对CK的活性表达。结果 1.287～51.47μg·mL-1肌酸与峰面积的线性关系良好,回归方程为:Y=0.023X-0.0288(r2=0.9992),检测限为0.4290μg·mL-1,平均加样回收率为100.3%,平均日内和日间精密度的RSD分别为2.22%、8.63%。尿肌酸的测定结果与验证集比较,具有良好的相关性;与校正集比较,具有较好的相关性。SD大鼠在高强度运动后,其尿肌酸的水平发生明显变化,48 h达峰,具有性别差异。其中,雄鼠达峰后下降缓慢,而雌鼠出现快速下降趋势。结论尿肌酸与尿ATP的含量均能反映CK活性,且检测步骤更简捷、成本更低,可成为快速检测CK的较好方法。

• 单位
  四川大学