人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定

作者：焦凌霞; 徐茜茜; 刘媛; 张宵; 梁颖; 刘贤金

来源：中国食品学报, 2017, 17(10): 268-273.

DOI：10.16429/j.1009-7848.2017.10.036

• Cry1Ab毒素
• 单域抗体
• 噬菌体展示技术
• 正负筛选
• ELISA

以Cry1Ab毒素作为抗原,将扩增后的噬菌体单域抗体库与固相化包被的Cry1Ab毒素特异性结合,利用噬菌体展示技术从人源化噬菌体单域抗体库(DAB)中筛选抗Cry1Ab毒素的单域抗体。采用正负筛选方法,经4轮"吸附-洗脱-扩增"后,富集特异性识别Cry1Ab毒素的噬菌体单域抗体。第4轮筛选得到的单菌落经单克隆ELISA鉴定,获得6株对Cry1Ab毒素具有较强结合活性的阳性单域抗体菌株,经PCR鉴定和DNA测序,均有完整的单域抗体基因片段插入。对6株阳性克隆的氨基酸序列进行比对分析,其序列差异主要存在于单域抗体的CDR区。

• 单位
  河南科技学院; 农业部