阿帕替尼通过ABCB1逆转非小细胞肺癌紫杉醇耐药的机制

作者：张勇; 黄念^*; 李秋波; 许瑞琪

来源：中华肿瘤防治杂志, 2021, 28(19): 1448-1455.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2021.19.04

• 阿帕替尼
• ABCB1
• 逆转
• 紫杉醇耐药性
• 非小细胞肺癌

目的探讨阿帕替尼通过调控ABCB1逆转非小细胞肺癌(NSCLC)紫杉醇(PTX)耐药性的相关机制。方法肺腺癌细胞株A549购自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所。用PTX诱导NSCLC细胞株A549转化为PTX耐药细胞株A549/PTX,通过阿帕替尼培养将A549/PTX细胞株分为PTX组和阿帕替尼剂量组。MTT法测定药物对肺癌细胞抑制率,分析阿帕替尼逆转A549/PTX细胞的PTX耐药性。通过对PTX积累实验、Rh123蓄积实验、碘化丙锭染色法测定A549/PTX细胞周期以及AnnexinⅤ-FITC/PI双染法对A549/PTX细胞凋亡的分析。结果A549/PTX细胞中PTX的平均IC50值为(1.40±0.15)nmol/L较A549细胞的(0.03±0.01)nmol/L增大,差异有统计学意义,t=22.302,P<0.05,证明成功建立NSCLC PTX耐药细胞株A549/PTX。MTT法证明阿帕替尼对A549/PTX抑制率较PTX提升,且呈阿帕替尼浓度依赖性,F=21.600,P<0.05。PTX在A549/PTX细胞中的积累(0.31±0.03)少于A549细胞(1.64±0.11),差异有统计学意义,t=29.416,P<0.05。PTX在细胞里蓄积量减少可能是A549/PTX细胞耐药的主要原因之一。随着阿帕替尼浓度的增加,细胞内Rh123蓄积量增加,证明阿帕替尼是通过对ABCB1蛋白的抑制来实现对PTX治疗NSCLC耐药性的逆转作用。当PTX联合阿帕替尼用药时,A549/PTX细胞的G2/M期细胞受到阻滞,细胞凋亡率增加,2种药物存在拮抗作用,F=236.496,P<0.05。[125I]-IAAP标记ABCB1底物,通过UV-Vis定量分析得出,阿帕替尼能有效抑制ABCB1的底物,并且呈浓度依赖性。结论阿帕替尼通过抑制ABCB1的表达逆转PTX治疗NSCLC的耐药性,抑制癌细胞增殖且促进癌细胞凋亡。

• 单位
  荆门市第一人民医院