RNA干扰抑制pyk2表达对大肠癌细胞凋亡和增殖的影响

作者：边大鹏; 汪欣; 刘玉村; 万远廉; 张宗耐; 朱静

来源：武警医学, 2012, 21(04): 281-283+286.

DOI：10.14010/j.cnki.wjyx.2010.04.029

• pyk2
• Lovo
• RNAi
• 凋亡
• 增殖

目的探讨富含脯氨酸的酪氨酸蛋白激酶2(proline-rich tyrosin kinase-2,pyk2)对Lovo大肠癌细胞凋亡和增殖的影响。方法利用两组构建有pyk2 shRNA(短发夹RNA,会在细胞内顺序反应而产生siRNAs)的质粒载体瞬时转染Lovo细胞系,设立空白对照组和阴性对照组,应用PCR和western blot方法检测转染组和对照组细胞中pyk2 mRNA与蛋白表达水平的变化,通过细胞计数法来绘制细胞生长曲线,利用流式细胞技术(FCM)检测转染组与对照组细胞在凋亡和细胞周期S期分布的差异。结果转染pyk2shRNA质粒的Lovo细胞凋亡水平明显低于对照组,S期细胞数显著增多,细胞绝对数增加,生长更加活跃。结论 pyk2能够升高Lovo大肠癌细胞的凋亡水平,降低其增殖水平。

• 单位
  民航总医院; 北京大学第一医院