Penicilazaphilone C抑制NETosis诱导哮喘炎症的机制研究

作者：黄俊敏; 王才春^*

来源：海南医学, 2023, 34(08): 1065-1071.

• 小鼠
• 哮喘
• 炎症
• 中性粒细胞
• 中性粒细胞胞外诱捕网
• 组蛋白
• 机制

目的 探讨Penicilazaphilone C (PAC)对哮喘小鼠炎症反应的影响，以及中性粒细胞胞外诱捕网的形成(NETosis)介导哮喘发生发展的可能机制。方法 在体外，采用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导健康小鼠的中性粒细胞产生中性粒细胞胞外诱网(NETs)。设置四组PAC的不同剂量组及对照组，通过测定dsDNA的产生了解抑制效果。在体内，采用脂多糖(LPS)诱导建立哮喘小鼠模型，将30只小鼠随机分成对照组、哮喘组、地塞米松组、DNaseⅠ组及PAC组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子和炎性细胞水平；对肺组织采用HE染色、PAS染色及免疫荧光；通过Western blotting检测肺组织中的瓜氨酸化组蛋白；通过荧光镜检验证哮喘小鼠是否产生了NETs。结果 在体外，1.2 mg/mL的PAC可以显著抑制NETs的形成[0.3 mg/mL、0.6 mg/mL、0.9 mg/mL、1.2 mg/mL PAC组结果分别为(0.72±0.17) RFU、(0.35±0.09) RFU、(0.16±0.02) RFU、(0.11±0.03) RFU)]，差异有统计学意义(P<0.05)；在体内实验中，小鼠BALF中的dsDNA与对照组(165.40±6.99) ng/mL相比，哮喘组(300.00±8.27) ng/mL的含量明显增加，差异有统计学意义(P<0.05);BALF中有大量细胞因子及炎性细胞，中性粒细胞约占62%，肺组织明显受损。PAC组小鼠的中性粒细胞水平为(235.50±21.03)×104cells/mL，明显低于哮喘组的(796.50±12.47)×104cells/mL，差异有统计学意义(P<0.05);PAC组小鼠肺组织病理改变较哮喘组明显减少，PAC组小鼠的炎症评分为(1.17±0.41)分，明显低于哮喘组的(3.17±0.75)分，差异有统计学意义(P<0.05)；与哮喘组对比，PAC组Western blotting检测出的瓜氨酸化组蛋白水平显著下降。结论 利用LPS成功建立中性粒细胞型哮喘小鼠模型；PAC可以显著缓解哮喘小鼠炎症，其机制与抑制瓜氨酸化组蛋白和NETosis有关。

• 单位
  海南医学院第一附属医院