miR-376b-3p对HepG2细胞Ⅱ相代谢酶UGT2B7的调控

作者:李敏; 江泽斌; 郑付春*
来源:汕头大学医学院学报, 2021, 34(03): 129-132.
DOI:10.13401/j.cnki.jsumc.2021.03.001

摘要

目的:探讨miR-376b-3p对HepG2细胞Ⅱ相代谢酶UGT2B7的调控作用。方法:构建含有UGT2B7序列的重组质粒并进行双荧光素酶基因活性检测;利用荧光定量PCR技术检测miR-376b-3p对UGT2B7 mRNA表达的影响;使用蛋白印迹法检测miR-376b-3p对UGT2B7蛋白表达的影响。结果:与miR-376b-3p阴性对照组相比,在HEK293T细胞中共转染miR-376b-3p与UGT2B7 3′-UTR野生型质粒组荧光素酶活性降低13%,差异具有统计学意义(P<0.05),共转染miR-376b-3p与UGT2B7 3′-UTR突变体质粒组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05);与阴性对照组相比,在HepG2细胞中转染miR-376b-3p模拟物组的UGT2B7 m RNA水平下降44%,转染miR-376b-3p抑制剂组升高41%,差异均具有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组相比,在HepG2细胞中转染miR-376b-3p模拟物组的UGT2B7蛋白表达下降34%,转染miR-376b-3p抑制剂组升高67%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-376b-3p与UGT2B7 3′-UTR直接结合,通过降解UGT2B7 m RNA、抑制UGT2B7蛋白翻译而进行转录后调控。

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