携带增强绿色荧光蛋白基因的人14-3-3σ真核表达载体的构建及其在转染乳腺癌MCF-7细胞的表达

作者：郝苗; 齐凤杰; 马玲

来源：中国全科医学, 2013, (15): 1342-1345.

• 乳腺肿瘤
• 基因
• 绿色荧光蛋白质类 Breast neoplasms
• Genes
• Green fluorescent proteins

目的构建携带增强绿色荧光蛋白基因的人14-3-3σ真核表达载体pEGFP-GV142-SFN并转染至人乳腺癌MCF-7细胞,鉴定所表达的蛋白活性。方法通过逆转录-聚合酶链反应从胎脑组织中获得编码14-3-3σ的全长cDNA,定向克隆至真核表达载体GV142中,鉴定正确后与带有增强绿色荧光蛋白的pEGFP-N1-SFN酶切后连接,重组携带14-3-3σ的表达载体pEGFP-GV142-SFN。将pEGFP-GV142-SFN质粒转染至乳腺癌MCF-7细胞,观察荧光蛋白的表达。结果经限制性内切酶酶切分析、聚合酶链反应和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,荧光显微镜下观察发现:转染24 h后,...

• 单位
  锦州医科大学; 辽宁医学院附属第一医院