摘要

目的观察Bad联合Caspase-8促凋亡基因共表达对SK-HEP-1肝癌细胞体外增殖、凋亡、迁移和体内成瘤影响。方法利用基因重组技术构建Bad-Caspase-8共表达融合基因。慢病毒转染SK-HEP-1肝癌细胞72 h后,蛋白质免疫印迹法观察细胞中Bad蛋白和Caspase-8蛋白表达,CCK-8法检测BadCaspase-8融合基因过表达对SK-HEP-1肝癌细胞增殖影响,流式细胞仪检测其对SK-HEP-1肝癌细胞凋亡影响,Transwell侵袭实验检测转染后细胞迁移变化,最后将转染SK-HEP-1肝癌细胞接种至裸鼠皮下观察成瘤效果。结果转染72 h后,SK-HEP-1肝癌细胞中Bad蛋白和Caspase-8蛋白水平显著增加,细胞增殖能力显著降低,实验组、对照组和空白组OD值分别为0.86±0.122、1.89±0.315和2.01±0.194,P <0.001;转染后SK-HEP-1肝癌细胞凋亡率明显增加,实验组、对照组和空白组细胞凋亡率分别为(31.6±2.8)%、(3.2±0.9)%和(2.9±1.1)%,P <0.001,转染后SK-HEP-1肝癌细胞迁移能力显著降低,实验组、对照组和空白组细胞迁移数分别为18±3,77±10和85±11,P <0.001;细胞接种至裸鼠皮下15 d,与对照组和空白组相比,实验组肿瘤生长速度缓慢,实验组、对照组和空白组成瘤体积分别为(1.6±0.17)cm3、(4.4±0.29)cm3和(4.9±0.42)cm3,P <0.001。结论促凋亡基因Bad和Caspase-8共表达可显著降低SK-HEP-1肝癌细胞增殖活性,促进SK-HEP-1肝癌细胞凋亡,减少SK-HEP-1肝癌细胞迁移,抑制SK-HEP-1肝癌细胞体内成瘤效率,可作为肝癌靶向治疗潜在靶点。