激活腺苷酸活化蛋白激酶α在苯扎贝特抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞炎症中的作用

作者：李骞; 张强^*; 叶伟祥; 黄志坚; 李秀研

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2018, 32(07): 528-534.

• 腺苷酸活化蛋白激酶α
• 苯扎贝特
• 氧化低密度脂蛋白
• 血管内皮细胞
• 炎症

目的探索激活腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)在苯扎贝特(BZF)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症中的作用。方法将HUVEC与ox-LDL 50 mg·L-1和(或)BZF(25～100μmol·L-1)共孵育24 h,荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)m RNA的表达。Western蛋白印迹法检测TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和NF-κB(P65)的磷酸化水平。采用分子对接软件Autodock探索AMPK用于进行分子对接的蛋白结构是AMPKα与β复合物,与BZF之间的相互关系。将原代HUVEC与BZF 25～100μmol·L-1孵育24 h后,Western蛋白印迹法检测p-AMPKα和AMPKα表达水平。BZF与AMPKα抑制剂Compound C5μmol·L-1共孵育HUVEC 24 h,观察AMPKα对BZF抑制ox-LDL诱导HUVEC炎症的影响。结果与细胞对照组比较,ox-LDL刺激24 h,HUVEC的TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和p-P65的表达明显升高(P<0.01);不同浓度BZF显著抑制ox-LDL诱导的HUVEC中TNF-α,IL-6,ICAM-1,VCAM-1和p-P65表达的升高(P<0.01)。分子对接模拟显示,BZF与AMPK结合力为-8.66 kcal·mol-1。与细胞对照组比较,BZF能显著升高HUVEC中p-AMPKα的表达(P<0.01)。与ox-LDL+BZF处理组比较,AMPKα抑制剂ox-LDL+BZF+Compound C组TNF-α,IL-6,ICAM-1和VCAM-1表达显著升高(P<0.01)。结论 AMPKα的激活在BZF抑制ox-LDL诱导HUVEC炎症中发挥重要作用。

• 单位
  福建医科大学附属泉州第一医院