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摘要
目的研究人型支原体来源的精氨酸脱亚胺酶(MhADI)在大肠杆菌中的表达及纯化。方法人工合成密码子优化的人型支原体来源的adi基因片段,定向插入到pET-22b载体的NdeⅠ和XhoⅠ位点之间;重组的表达载体pET22b-adi转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;表达产物通过透析复性后经DEAE离子交换层析纯化,SDS-PAGE检测表达及纯化结果 ;纯化的重组蛋白用二乙酰一肟-氨基硫脲比色法检测比活。结果成功诱导表达分子量为48 kDa的重组蛋白,目的产物以包涵体形式表达,表达量约为细胞总蛋白的15%。纯化后蛋白纯度达95%以上,比活为3 IU。结论本研究方法可制备得到较高纯度活...
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单位生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学
