肾元颗粒含药血清对高糖诱导人肾小管上皮-间充质细胞转分化中Klotho/FGFR1/FGF2信号途径的影响

作者：陈立; 王小琴^*; 袁军; 詹理睿; 万亚琴

来源：中国中西医结合杂志, 2018, 38(10): 1215-1221.

• 肾元颗粒
• 肾小管上皮细胞
• Klotho/FGFR1/FGF2信号转导途径

目的探讨高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质细胞转分化过程中Klotho/FGFR1/FGF2信号转导途径的表达及肾元颗粒含药血清的干预作用。方法 30只Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组、肾元颗粒组及厄贝沙坦组,每组10只,灌胃7天后门静脉取血。采用CCK-8法测定细胞增殖率以确定大鼠血清加入浓度,以LDH法检测含药血清对HK-2细胞的毒性作用。以高糖(30 mmol/L)诱导HK-2细胞上皮-间充质细胞转分化建立模型,分为正常组、模型组、高渗对照组、肾元颗粒组、厄贝沙坦组及ERK阻断剂组。免疫荧光检测Klotho及FGF2的表达,Western blot及RT-PCR检测Klotho、FGF2、ECadherin、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达水平,Western blot分析各组细胞ERK及磷酸化ERK(p-ERK)水平。结果 CCK-8法结果显示大鼠空白血清培养HK-2细胞最佳浓度为20%。LDH结果显示,与10%胎牛血清比较,肾元颗粒含药血清、厄贝沙坦含药血清对细胞LDH活性的影响差异无统计学意义(P> 0. 05)。与正常组比较,模型组Klotho、E-Cadherin蛋白及m RNA表达降低(P <0. 05),FGF2、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达增高(P <0. 05),p-ERK水平显著增高(P <0. 05)。与模型组比较,肾元颗粒组Klotho、E-Cadherin蛋白及m RNA表达显著增高(P <0. 05),FGF2、α-SMA、FN、CollgenⅣ蛋白及m RNA表达显著降低(P <0. 05),p-ERK水平显著降低(P <0. 05)。结论肾元颗粒含药血清能改善高糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化,其作用机制可能与调节Klotho/FGFR1/FGF2信号通路有关。

• 单位
  湖北省中医院; 湖北文理学院; 湖北中医药大学; 襄阳市中心医院