纳米银-猪小肠黏膜下层治疗肛瘘的愈合机制

作者：陶禹; 李干斌; 张皓宇; 曹可; 王振军; 韩加刚^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(08): 1516-1522.

DOI：10.3760/cma.j.cn421213-20220216-00112

• 肛瘘
• 猪小肠黏膜下层
• 纳米银
• 动物模型
• 愈合

目的探讨纳米银-猪小肠黏膜下层(NS-PSIS)治疗肛瘘动物模型的愈合机制。方法建立新西兰兔肛瘘动物模型, 根据随机数字表随机分为实验组和对照组各12只。实验组使用NS-PSIS填塞治疗肛瘘, 对照组使用猪小肠黏膜下层(PSIS), 并在术后12、24、48 h及14 d获取肛瘘组织标本(每组3只)。行苏木素-伊红染色检查肛瘘组织的愈合情况。行Masson染色评估肛瘘边缘组织中胶原沉积情况, 并定量分析。行免疫组织化学方法检测肛瘘边缘组织中CD34的表达, 计算微血管密度(MVD);检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad2、COLⅠ和COLⅢ的蛋白表达, 并定量分析。行实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肛瘘边缘组织中TGF-β1/Smad2/COLⅠ/COLⅢ信号通路相关分子TGF-β1、Smad2、COLⅠ和COLⅢ的mRNA表达。符合正态分布的计量资料, 两组间比较采用独立样本t检验, 否则采用Wilcoxon秩和检验。结果成功构建NS-PSIS, 并建立新西兰兔肛瘘模型。NS-PSIS和PSIS填塞治疗肛瘘早期(术后12～48 h), 两组的瘘道周围均可见明显炎性细胞浸润、成纤维细胞增殖、胶原合成和新生血管形成。Masson染色显示, 在术后48 h, NS-PSIS组的胶原合成明显多于PSIS组[(29.40±2.80)%比(20.97±1.68)%, t=-7.752, P<0.01]。免疫组织化学显示, 在术后48 h, NS-PSIS组的MVD明显高于PSIS组[6.8(5.2, 7.8)比5(4, 6.8), Z=-2.969, P<0.01];在术后24 h, NS-PSIS组COLⅠ[(22.06±2.83)%比(13.5±2.88)%, t=-6.342, P<0.01]和COLⅢ[(25.70±3.44)%比(20.02±2.45)%, t=-4.038, P<0.01]的表达水平均明显高于PSIS组;在术后48 h, NS-PSIS组的COLⅠ[(28.71±3.81)%比(20.09±3.07)%, t=-5.284, P<0.01]和COLⅢ[(30.59±1.41)%比(24.01±1.77)%, t=-8.710, P<0.01]的表达水平均明显高于PSIS组;此外, 在术后48 h, NS-PSIS组的TGF-β1[19.71(18.56, 20.90)%比13.50(11.34, 14.71)%, Z=-3.621, P<0.01]和Smad2[(18.56±2.57)%比(12.22±2.55)%, t=-5.249, P<0.01]的表达水平明显高于PSIS组。RT-qPCR显示, 在术后48 h, NS-PSIS组的TGF-β1[8.62(8.57, 9.05)比6.87(6.51, 7.14), Z=-3.621, P<0.01]、Smad2[13.44(11.25, 13.59)比10.05(9.05, 10.37), Z=-3.616, P<0.01]、COLⅠ[4.02(3.84, 5.82)比2.58(2.08, 4.08), Z=-2.012, P<0.01]和COLⅢ[12.12(11.60, 14.60)比9.24(7.25、9.52), Z=-3.604, P<0.01]的mRNA表达水平均明显高于PSIS组。结论肛瘘填塞治疗早期(术后48 h) NS-PSIS促进新生血管生成和胶原合成的能力可能优于PSIS, 其机制可能与激活TGF-β1/Smad2/COLⅠ/COLⅢ信号通路相关。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学; 首都医科大学附属北京朝阳医院