变性高效液相色谱法在FALS突变位点检测中的应用

作者：胡俊; 史树贵; 李露斯; 吴玉章; 倪兵

来源：第三军医大学学报, 2005, (13): 1374-1376.

• 家族性肌萎缩侧索硬化症
• 铜、锌超氧化物歧化酶
• 变性高效液相色谱法
• 突变

目的检测一个肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)家系的铜、锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)基因的突变位点,同时观察变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)的实用价值。方法对PCR-SSCP检测阴性的外显子,应用DHPLC法及DNA直接测序技术,再次进行SOD1基因的突变位点检测。结果经DHPLC检测,家系成员Ⅲ1SOD1基因的第4外显子有突变峰,DNA直接测序证实存在杂合子,发生了GAA→GGA错义突变,使编码的氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸。结论DHPLC技术与PCR-SSCP相比有更高的敏感性,可作为大样本筛查突变位点的一种便捷可靠手段。

• 单位
  神经内科; 第三军医大学; 第三军医大学西南医院