siRNA抑制弓形虫次黄嘌呤-黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的表达

作者：余莉; 李霞; 郜玉峰; 罗庆礼; 乔增培; 沈继龙

来源：安徽医科大学学报, 2008, 43(04): 376-380.

DOI：10.3969/j.issn.1000-1492.2008.04.005

• 嘌呤类/代谢
• 次黄嘌呤磷酸核糖转移酶
• RNA
• 小分子干扰 purines/metabolism
• hypoxanthine phosphoribosyltransferase
• RNA
• small interfering

目的探讨小干扰RNA(siRNA)在弓形虫体内的对目的基因的表达调节作用。方法以弓形虫嘌呤代谢过程中的关键酶——次黄嘌呤、黄嘌呤、鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HXGPRT)编码基因为靶标,合成3对siRNA,以电穿孔的方式将不同的浓度的siRNA转染弓形虫。采用荧光定量PCR及[3H]-次黄嘌呤摄入量分别检测弓形虫HXGPRT mRNA及酶合成量。结果在针对HXGPRT编码基因设计的3对21nt的siRNA中,有1对(siRNA415)能明显降低HXGPRT mRNA水平及酶合成量。在转染后24h,4μmol/LsiRNA415电转弓形虫的HXGPRT mRNA水平及[3H]-次黄嘌呤摄入量分别降为...

• 单位
  安徽医科大学; 安徽中医药大学; 安徽医科大学第一附属医院