miRNA-146b对小鼠c-kit~+心脏干细胞迁移、增殖、分化能力的影响

作者：宋东强; 范虞琪; 许左隽; 殷兆芳; 王长谦

来源：心血管康复医学杂志, 2013, 22(02): 113-118+100+197.

• 干细胞
• 微RNAs
• 细胞增殖
• 细胞运动

目的:通过调控心脏干细胞(CSCs)中的miRNA-146b的表达水平,探讨miRNA-146b对CSCs迁移、增殖和分化的影响。方法:取1～3d的C57BL/6小鼠的CSCs,经过磁珠分选,选取c-kit+CSCs培养。c-kit+CSCs在骨髓间充质干细胞培养液刺激下,后以实时聚合酶链式反应(RealtimePCR)检测c-kit+CSCs的miRNA146b表达水平。进一步将c-kit+CSCs培养3d后分为5组进行转染:空白对照组、上调miRNA-146b组、上调阴性对照组、下调miRNA-146b组、下调阴性对照组。以CCK-8法检测转染后c-kit+CSCs增殖,transwell法检测转染后c-kit+CSCs迁移。PCR法检测GATA-4、MEF2c、TNI、β-MHC等分化相关基因表达水平。结果:在骨髓间充质干细胞培养液刺激下c-kit+CSCs的miRNA-146b表达上调(P<0.05)。在miRNA-146b的前体或抑制剂转染后,能有效使c-kit+CSCs细胞内miRNA-146b过表达或抑制,与上调阴性对照组比较,上调miRNA-146b组的miRNA-146b表达明显升高[(2.26±1.57)比(340.54±36.63)],与下调阴性对照组比较,下调miRNA-146b组miRNA-146b表达明显下降[(1.11±0.16)比(0.66±0.04)],P均<0.01。同阴性对照组比较,上调miRNA-146b组c-kit+CSC迁移能力明显降低[(70.6±9.1)比(47±5.3)],下调miRNA-146b组的c-kit+CSCs迁移能力明显增强[(39.5±4.1)比(48.0±8.8)],P均<0.05。与上调阴性对照组比较,上调miRNA-146b组的c-kit+CSCs增殖活性显著降低;与下调阴性对照组比较,下调miRNA-146b组的c-kit+CSCs增殖活性显著增强,P均<0.05。miRNA-146b对分化无明显影响。结论:miRNA-146b能够抑制c-kit+CSCs增殖和迁移能力。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院