PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用

作者：梁琳; 逄春华; 罗亚坤; 周灵; 王静; 刘畅; 刘琪; 崔尚金

来源：中国畜牧兽医, 2017, 44(12): 3440-3445.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.12.007

• 双重纳米PCR
• 猪圆环病毒2型(PCV2)
• 猪圆环病毒3型(PCV3)
• 病原检测

本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重纳米PCR(nanodPCR)方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。

• 单位
  农业部; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所