mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因重组腺病毒对B16动物模型的抑瘤作用

作者：孟佳丽; 龙雨清; 林静; 李昕; 尚翠玲; 王小月; 蓝肇煜; 李丹; 金天明^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(10): 1921-1926.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.10.07

• 重组腺病毒
• HN基因
• mTERT启动子
• mTyr启动子
• B16裸鼠
• 黑色素瘤

为探讨双启动子调控HN基因重组腺病毒Ad-mTERTp-mTyrp-HN对小鼠黑色素瘤动物模型的抑瘤作用,试验构建B16裸鼠皮下移植瘤模型,采用HEK293细胞扩增重组腺病毒,进行纯化和滴度检测。将重组腺病毒Ad-HN、Ad-mTERTp-HN、Ad-mTyrp-HN、Ad-mTERTp-mTyrp-HN、Ad-GFP和PBS通过尾静脉注射裸鼠,冰冻切片观察裸鼠肿瘤内GFP绿色荧光表达情况,通过肿瘤生长和裸鼠存活情况计算抑瘤率,探究其在体内的抗肿瘤作用。结果显示:重组腺病毒在HEK293细胞中扩增,滴度分别为1011.250,1012.250,1010.625,1012.125,1012.250TCID50/mL;肿瘤组织中能观察到黑色素细胞,证明皮下黑色素移植瘤模型构建成功;重组腺病毒对脏器无损伤,且在双启动子组脏器中没有观察到黑色素细胞的肝肺转移;通过尾静脉注射重组腺病毒后能够在肿瘤中观察到荧光表达;与其他组相比双启动子组重组腺病毒不但能抑制黑色素瘤的生长,而且能延长裸鼠的生存期,抑瘤率为55.5%。因此,该重组腺病毒Ad-mTERTp-mTyrp-HN具有靶向性,并且可以抑制肿瘤生长,可为黑色素瘤的治疗提供参考。

• 单位
  天津农学院; 南开大学; 吉林大学