猪圆环病毒2型Rep蛋白ELISA抗体检测方法的建立

作者：李杰; 葛猛; 罗维; 舒晓亮; 蒋大良; 李润成; 李波; 刘国华; 余兴龙

来源：中国预防兽医学报, 2012, (11): 894-897.

• 猪圆环病毒
• Rep蛋白
• 原核表达
• 间接ELISA porcine circovirus
• Rep protein
• prokaryotic expression
• indirect ELISA

为建立一种快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的方法,本研究通过基因合成PCV2的Rep编码序列,将其克隆至pET-28a(+)并在E.coli中表达,表达的重组Rep蛋白经Ni2+亲和纯化。采用纯化的目的蛋白作为包被抗原,建立检测PCV2 Rep蛋白抗体的间接ELISA方法。结果表明最佳抗原包被浓度为200 ng/孔,血清和二抗最佳反应时间分别为1 h和30 min。该方法具有良好的特异性和敏感性,与韩国金诺公司试剂盒的符合率为81.4%,表明建立的ELISA方法可以用于PCV2的流行病学检测。

• 单位
  怀化市动物防疫监督站; 湖南农业大学