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摘要
目的:通过探究单个磁珠的有效免疫反应体积(NEIV),在微观水平上揭示磁珠的免疫反应过程,为大体积样本检测过程中磁珠的用量提供理论指导。创新点:首次提出"单个磁珠的有效免疫反应体积"这一概念,提出在微观水平上对磁珠免疫反应进行探究,为进一步研究磁珠-抗原免疫反应的动力学过程打下基础。方法:首先,采用两种直径的磁珠对50μl不同浓度的抗原进行比色检测,证明磁珠上抗原的结合位点过量。随后,采用定量磁珠对相同浓度不同体积的抗原进行检测,得出"单个磁珠的有效免疫反应体积"这一概念。接着,采用三种不同用量的磁珠对浓度相同、体积梯度增大的抗原进行检测,以验证所提出的NEIV的概念。然后,通过测定孵育时长、孵育温度和震荡与否对比色结果的影响,找到对NEIV影响的关键因素。最后采用定量磁珠,对梯度稀释的抗原进行检测,建立磁珠用量与比色结果的关系,对NEIV的实际应用提出展望。结论:对于同一直径的磁珠,在相同的孵育条件下,其单个磁珠的NEIV是恒定的,与磁珠用量和孵育体积无关。孵育温度、孵育时长和震荡与否是影响NEIV值的关键因素。采用NEIV这一参数可以在大体积样本检测之前,对磁珠的用量模拟提供有效指导。除此之外,NEIV更从微观角度上揭示了磁珠和抗原的免疫反应过程,为进一步研究磁珠-抗原免疫反应的动力学过程奠定了基础。
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