特异性小分子RNA沉默转录因子E2F-1表达对小鼠精原干细胞凋亡的影响

作者：曾汉青; 朱朝辉; 万锋; 王进; 李森; 张友朋

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(07): 1533-1535.

• RNA干扰
• 精原干细胞
• 转录因子E2F1
• 脱噬作用

目的观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默转录因子E2F-1表达对小鼠精原干细胞(SSCs)凋亡的影响。方法采用Percoll液密度梯度离心分离和流式细胞仪分选纯化SSCs进行体外培养,以脂质体法转染pSilencer4.1-E2F1至SSCs,并用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测E2F-1的表达水平,流式细胞仪检测siRNA干扰E2F-1表达后对SSCs凋亡的影响。结果 RT-qPCR结果实验组mRNA的2ΔΔCt值(0.32)明显低于未转染组(0.10)和阴性对照组(1.04),Western blot显示实验组条带灰度低于未转染组和阴性对照组,流式细胞术检测显示实验组凋亡率(7.69%)低于未转染组(23.07%)和阴性对照组(24.19%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 siRNA靶向干扰转录因子E2F-1能显著降低小鼠SSCs的凋亡率。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院