超微破壁饮片DNA条形码基原物种追溯

作者：向丽; 汤欢; 成金乐; 陈一龙; 邓雯; 郑夏生; 赖智填; 陈士林

来源：药学学报, 2015, 50(12): 1660-1667.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2015.12.012

• DNA条形码
• ITS2
• 破壁饮片
• 超微饮片

中药超微饮片和破壁饮片已失去中药材外观性状及显微鉴别特征,传统鉴定方法无法有效鉴定其真伪。本研究选用ITS2序列作为DNA条形码对全草类、根及根茎类、叶类、花类、果实类和种子类的31种代表性中药(28个物种)的原药材、超微饮片及破壁饮片共93份样品进行研究,验证DNA条形码技术对中药超微饮片和破壁饮片基原物种追溯的可靠性。通过DNA提取、PCR扩增及双向测序得到TIS2序列,在中药材DNA条形码鉴定系统和Gen Bank数据库中进行BLAST鉴定。采用MEGA 6.0软件进行序列比对及分析,运用K2P模型计算遗传距离,构建系统进化NJ树。结果表明93份样品均能提取DNA,PCR扩增及测序后均能得到高质量的ITS2序列。31种药材中,26种药材及其超微饮片和破壁饮片与基原植物的ITS2序列完全相同,5种药材的ITS2序列存在变异。31种中药材在中药材DNA条形码鉴定系统和Gen Bank数据库中均能通过BLAST比对到正确的标准序列。各物种种内变异较小,最大种内遗传距离均小于最小种间遗传距离,NJ树中28个物种的93条ITS2序列都与各自标准序列聚为一支。因此,基于ITS2序列的DNA条形码技术可准确、有效地鉴定原药材、超微饮片和破壁饮片,为中药超微饮片和破壁饮片生产过程质量追溯及产品市场监管提供有力保障。

• 单位
  国家中医药管理局; 中国中医科学院中药研究所