人巨细胞病毒US31蛋白的特异性抗体的制备及鉴定

李宝青; 项超丽; 谢尚丹; 施昕妤; 郭刚强; 薛向阳

摘要

目的制备人巨细胞病毒(HCMV) US31原核表达蛋白及其多克隆抗体。方法 HCMV US31基因经原核密码子优化后进行全基因合成,克隆至p ET21a(+)原核表达载体,构建p ET21a(+)/HCMV US31重组质粒,测序鉴定;将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,Ni-NTA亲和层析法纯化US31蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA、Western blot及免疫荧光方法检测抗体效价和特异性。结果在大肠杆菌中诱导出高表达的HCMV US31融合蛋白,经镍柱亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;免疫新西兰兔诱导产生特异性的Ig G抗体,效价为1∶49 6...

单位
温州医科大学; 温州医科大学附属第二医院; 第二临床医学院

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更新时间：2020-11-17 03:25

人巨细胞病毒US31蛋白的特异性抗体的制备及鉴定

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