猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000的表达、纯化及活性分析

作者：王涛; 郑玉玲; 袁媛; 江华; 郝淮杰; 李雪琴; 姜永强

来源：中国人兽共患病学报, 2013, (08): 757-761.

• 猪链球菌
• SSU05_1000
• 紧密连接 Streptococcus suis
• tight junction

目的构建猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并研究其对细胞间紧密连接的调控作用。方法以05ZYH33基因组为模板设计引物,构建pET30a-SSU05_1000重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用镍亲和层析的方法对目的蛋白进行纯化,Western blot检测其对人脑微血管内皮细胞紧密连接的调控。结果构建的SSU05_1000重组表达质粒能够在大肠杆菌中高效表达,纯化的SSU05_1000蛋白纯度达90%以上,Western blot结果显示其与人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)相互作用后,可以下调细胞间紧密连接蛋白Cla...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 安徽医科大学; 中国科学院微生物研究所