肝衰竭患者血浆对永生化人肝细胞增殖和肝细胞功能蛋白表达的影响

作者：何秋丽; 许诚; 李盼; 娄晋宁; 李宓

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2017, 31(10): 971-974.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2017.10.010

• 肝衰竭
• 血浆
• 永生化人肝细胞
• 生物人工肝
• 肝细胞生长因子

目的探讨肝衰竭患者血浆对永生化人肝细胞(immortalized human hepatocytes,IHH)增殖和肝细胞功能蛋白谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(uridine diphosphate glucuronosyltransferase,UGT)和白蛋白(albumin,Alb)表达的影响。方法 IHH细胞分为观察组和对照组,对照组细胞采用含体积分数5%胎牛血清的培养基进行培养,观察组细胞采用含体积分数5%肝衰竭患者血浆的培养基进行培养,应用倒置显微镜观察2组细胞生长状态,采用CCK8法测定2组细胞第1、3、5、7、9天增殖情况,并绘制生长曲线;采用Western blot法检测2组细胞中肝细胞功能蛋白GS、GST、UGT、Alb及肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR检测2组细胞中HGF mRNA表达水平。结果2组细胞形态正常,呈梭形贴壁生长,观察组细胞第5、7、9天时细胞增殖吸光度值(1.44±0.08、1.87±0.11、1.95±0.06)明显高于对照组(1.26±0.06、1.62±0.08、1.78±0.07)(P<0.05);观察组细胞Alb表达水平(1.32±0.07)高于对照组(0.94±0.05)(P<0.05),GS、GST、UGT表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组细胞HGF mRNA和蛋白(7.940±0.203、1.17±0.05)表达水平均高于对照组(1.020±0.135、0.97±0.04)(P<0.05)。结论肝衰竭患者血浆可促进IHH细胞增殖,上调肝细胞功能蛋白Alb表达,同时对GS、GST、UGT蛋白表达无明显影响;其促增殖机制可能与HGF表达上调有关。

• 单位
  中日友好医院; 深圳市第三人民医院; 中山大学附属第五医院; 临床医学研究所